Neste exame, é injetado um contraste ou corante fluorescente (fluoresceína de sódio) em uma das veias periféricas (geralmente do braço) do paciente. Após alguns segundos, esse contraste entra na circulação da Retina e da Coróide, localizadas no fundo do olho.O examinador acompanha o aparecimento do contraste correndo pelos vasos da Retina desde a sua fase inicial, passando pela fase de enchimento completo até a fase tardia, quando o contraste já vai desaparecendo gradualmente.

A análise e interpretação do exame é feita em todas as fases circulatórias, evidenciando muito bem o problema existente, assim como elucidando o tipo de tratamento ideal para cada caso. O corante fluorescente é estimulado através da emissão de uma luz azul diretamente na Retina. Quando estimulada, a fluoresceína emite fótons em tons de cor amarelo e verde.A emissão dessa luminosidade pelo corante fluorescente é captado através de uma câmera fotográfica, que irá fotografar várias vezes o fundo de olho.